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應(yīng)用案例
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轉(zhuǎn)錄組學(xué)揭示常壓室溫等離子體誘變對微生物透明質(zhì)酸生物合成的影響機(jī)制

來源:   作者: 發(fā)布日期:2023-06-15 訪問量:2844

     本期為您推薦江南大學(xué)史勁松教授研究團(tuán)隊發(fā)表在《Carbohydrate Polymers》(IF=10.7237)上的一篇文章:Genetic variation reveals the enhanced microbial hyaluronan biosynthesis via atmospheric and room temperature plasma. 該研究采用多輪常壓室溫等離子體(ARTP)誘變結(jié)合新型高通量篩選,結(jié)果顯示獸疫鏈球菌的透明質(zhì)酸(HA)產(chǎn)量在搖瓶水平上提高了42.9%,達(dá)到0.813 g/L;在5L發(fā)酵罐中分批培養(yǎng)后,HA產(chǎn)量能提高到4.56 g/L[1]

      透明質(zhì)酸是糖胺聚糖(GAG)家族成員,由N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和D-葡糖醛酸(GlcA)組成,它們通過交替的β-1,3和β-1,4糖苷鍵連接。HA作為一種優(yōu)異的天然生物聚合物,已被廣泛用于醫(yī)療、美容和臨床應(yīng)用。通過微生物發(fā)酵生產(chǎn)HA是一種理想方法,具有工藝流程簡單、純化程序便捷的特點。ARTP是一種新型微生物篩選誘變系統(tǒng),并已應(yīng)用于100多種天然微生物,在優(yōu)化各類微生物性能方面的作用較為強(qiáng)大。

       本研究揭示了獸疫鏈球菌HA生物合成增強(qiáng)的遺傳機(jī)制差異。經(jīng)過多輪ARTP誘變,結(jié)合新型牛血清白蛋白/十六烷基三甲基溴化銨偶聯(lián)高通量篩選,在搖瓶培養(yǎng)18h內(nèi),突變株的HA產(chǎn)量提高了42.9%,達(dá)到0.813 g/L,分子量為0.54×106Da。通過在5L發(fā)酵罐中分批培養(yǎng),HA產(chǎn)量提高到4.56 g/L。轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果顯示,不同突變株之間具有相似的遺傳變化,均通過增強(qiáng)HA的合成基因(hasB、glmU和glmM),削弱UDP-GlcNAc的下游基因(nagA和nagB),并顯著下調(diào)壁合成基因的轉(zhuǎn)錄,從而使兩種前體(UDP-GlcA和UDP-Glc NAc)的積累分別增加39.74%和119.22%。將有效的篩選方法與組學(xué)分析相結(jié)合,探索不同突變株之間的共同基因調(diào)控因子,可能為挖掘復(fù)雜的HA調(diào)控途徑提供更多的控制位點。

圖片7

圖片8

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[1] Zhi-Yuan Yao, Jin-Song Gong, Yu-Ru Liu, Jia-Yu Jiang, Yue-Sheng Zhang, Chang Su, Heng Li, Chuan-Li Kang, Lei Liu, Zheng-Hong Xu, Jin-Song Shi, Genetic variation reveals the enhanced microbial hyaluronan biosynthesis via atmospheric and room temperature plasma,Carbohydrate Polymers,312.

 

https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2023.120809

 

     本期為您推薦江南大學(xué)史勁松教授研究團(tuán)隊發(fā)表在《Carbohydrate Polymers》(IF=10.7237)上的一篇文章:Genetic variation reveals the enhanced microbial hyaluronan biosynthesis via atmospheric and room temperature plasma. 該研究采用多輪常壓室溫等離子體(ARTP)誘變結(jié)合新型高通量篩選,結(jié)果顯示獸疫鏈球菌的透明質(zhì)酸(HA)產(chǎn)量在搖瓶水平上提高了42.9%,達(dá)到0.813 g/L;在5L發(fā)酵罐中分批培養(yǎng)后,HA產(chǎn)量能提高到4.56 g/L[1]

      透明質(zhì)酸是糖胺聚糖(GAG)家族成員,由N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和D-葡糖醛酸(GlcA)組成,它們通過交替的β-1,3和β-1,4糖苷鍵連接。HA作為一種優(yōu)異的天然生物聚合物,已被廣泛用于醫(yī)療、美容和臨床應(yīng)用。通過微生物發(fā)酵生產(chǎn)HA是一種理想方法,具有工藝流程簡單、純化程序便捷的特點。ARTP是一種新型微生物篩選誘變系統(tǒng),并已應(yīng)用于100多種天然微生物,在優(yōu)化各類微生物性能方面的作用較為強(qiáng)大。

       本研究揭示了獸疫鏈球菌HA生物合成增強(qiáng)的遺傳機(jī)制差異。經(jīng)過多輪ARTP誘變,結(jié)合新型牛血清白蛋白/十六烷基三甲基溴化銨偶聯(lián)高通量篩選,在搖瓶培養(yǎng)18h內(nèi),突變株的HA產(chǎn)量提高了42.9%,達(dá)到0.813 g/L,分子量為0.54×106Da。通過在5L發(fā)酵罐中分批培養(yǎng),HA產(chǎn)量提高到4.56 g/L。轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果顯示,不同突變株之間具有相似的遺傳變化,均通過增強(qiáng)HA的合成基因(hasB、glmU和glmM),削弱UDP-GlcNAc的下游基因(nagA和nagB),并顯著下調(diào)壁合成基因的轉(zhuǎn)錄,從而使兩種前體(UDP-GlcA和UDP-Glc NAc)的積累分別增加39.74%和119.22%。將有效的篩選方法與組學(xué)分析相結(jié)合,探索不同突變株之間的共同基因調(diào)控因子,可能為挖掘復(fù)雜的HA調(diào)控途徑提供更多的控制位點。

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[1] Zhi-Yuan Yao, Jin-Song Gong, Yu-Ru Liu, Jia-Yu Jiang, Yue-Sheng Zhang, Chang Su, Heng Li, Chuan-Li Kang, Lei Liu, Zheng-Hong Xu, Jin-Song Shi, Genetic variation reveals the enhanced microbial hyaluronan biosynthesis via atmospheric and room temperature plasma,Carbohydrate Polymers,312.

 

https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2023.120809

 

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